西元前480年，波斯王薛西斯一世帶領大軍壓境希臘。陸軍30萬人在溫泉關與希臘斯巴達城邦國王雷奧尼斯帶領300名戰士為首的希臘聯軍展開攻防戰；上千艘的海軍戰艦則在海上與帝米斯托克斯帶領的雅典海軍短兵相見。「300壯士：帝國崛起」的時間設定相當有趣，與前作「300壯士：斯巴達的逆襲」故事時間重疊，並且電影從波希戰爭前階段，由波斯王大流士一世帶領波斯大軍第一次入侵希臘的馬拉松戰役開始講述。過程描述大流士一世的繼位者：薛西斯一世如何成為「神王」，展開對希臘的第二次入侵。電影的時間設定延續到斯巴達300壯士於溫泉關戰役壯烈犧牲，雅典淪陷後的薩拉米灣海戰。電影劇情在最後在最終高潮戛然而止，個人認為相當符合「帝國崛起（Rise of an Empire）」的副標題。姑且不論電影當中的細節是否符合影迷們的期待，整體而言，「300壯士：帝國崛起」的藝術成就，絕對又是一次相當出色的表現。
